Creazione di una serie di diluizioni chimiche

In chimica, una diluizione è il processo di riduzione della concentrazione di una sostanza in una soluzione. Una diluizione seriale o serie di diluizioni è la diluizione ripetuta di una soluzione per amplificare rapidamente il fattore di diluizione. Questo viene spesso eseguito durante esperimenti che richiedono soluzioni molto diluite con grande precisione, come quelli con curve di concentrazione su scala logaritmica o quegli esperimenti per determinare la densità della conta batterica. Le diluizioni seriali sono ampiamente utilizzate nelle scienze sperimentali, come la biochimica, la microbiologia, la farmacologia e la fisica.

Passi

Metodo 1 di 2: eseguire una diluizione standard

Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 1
1. Determina qual è il diluente giusto. Il liquido che utilizzerai per diluire una sostanza è molto importante. Molte soluzioni vengono diluite in acqua distillata, ma non è sempre così. Se hai intenzione di diluire batteri o altre cellule, probabilmente diluerai nei terreni di coltura. Il liquido scelto verrà utilizzato per ogni diluizione seriale.
  • Se non sei sicuro di quale diluente usare, chiedi aiuto o cercalo online per vedere se altre persone hanno fatto una diluizione simile.
Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 2
2. Preparare diverse provette con 9 ml di diluente. Queste provette servono come valori iniziali della tua diluizione. Aggiungerete il campione non diluito alla prima provetta e poi diluite in serie nelle provette successive.
  • È utile etichettare tutte le provette prima di iniziare per non confondersi una volta che si inizia a lavorare con le diluizioni.
  • Ciascuna provetta contiene una diluizione di 10 volte rispetto al liquido non diluito. La prima provetta diventa una diluizione di 1:10, la seconda di 1:100, la terza di 1:1000, ecc. Predeterminare il numero di diluizioni necessarie in modo da non sprecare provette o diluente.
  • Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 3
    3. Preparare una provetta con almeno 2 ml della soluzione non diluita. La quantità minima richiesta per questa diluizione seriale è 1 ml della soluzione non diluita. Se hai solo 1 ml, non otterrai alcuna soluzione non diluita rimanente. Etichetta questo tubo come OO per soluzione pulita.
  • Mescolare accuratamente la soluzione prima di diluire.
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    4. Effettuare la prima diluizione. Prendere 1 ml della soluzione non diluita in una provetta OO con una pipetta e trasferire nella provetta etichettata 1:10 con 9 ml di diluente e mescolare. C`è ora 1 ml della soluzione non diluita in 9 ml del diluente. Quindi la soluzione viene diluita di un fattore 10.
    Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 5
    5. Effettuare la seconda diluizione. Per la seconda diluizione in serie, prelevare 1 ml di soluzione dalla provetta 1:10 e farlo con la diluizione di 9 ml nella provetta 1:100. Mescolare la provetta 1:10 accuratamente prima di aggiungerlo alla provetta successiva. Ancora una volta la provetta 1:100 dopo la diluizione. La soluzione della provetta 1:10 è ora diluito 10 volte nella provetta 1:100.
    Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 6
    6. Estendere questa procedura per diluizioni seriali con più serie. Questo processo può essere ripetuto tutte le volte necessarie per ottenere la soluzione desiderata. In un esperimento con curve di concentrazione, puoi effettuare una diluizione seriale di una serie di soluzioni con diluizioni di 1, 1:10, 1:100, 1:1000.

    Metodo 2 di 2: Calcolare il fattore di diluizione finale e la concentrazione

    Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 7
    1. Calcolare il rapporto della diluizione finale in una diluizione seriale. Il rapporto di diluizione totale può essere determinato moltiplicando il fattore di diluizione di ciascuna fase che porta all`ultima fase. Questo può essere illustrato matematicamente con l`equazione DT=D1 xD2 xD3 x … x Dn per cui DT il fattore di diluizione totale è e Dn il rapporto di diluizione.
    • Ad esempio, supponiamo che tu abbia applicato una diluizione di 1:10 a un liquido 4x. Applica il tuo fattore di diluizione all`equazione: DT=10x10x10x10=10.000
    • Il fattore di diluizione finale nella quarta provetta della diluizione seriale è 1:10.000. La concentrazione della sostanza è ora 10.000 volte meno della soluzione originale non diluita.
    Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 8
    2. Determinare la concentrazione della soluzione dopo la diluizione. Per determinare la concentrazione finale della soluzione dopo la diluizione seriale, è necessario conoscere la concentrazione iniziale. L`equazione è Cvalore terminale= Cvalore iniziale/D per cui Cvalore terminale è la concentrazione finale della soluzione diluita, Cvalore iniziale la concentrazione iniziale della soluzione originale e D il rapporto di diluizione come precedentemente determinato.
  • Ad esempio: se hai iniziato con una soluzione di cellule con una concentrazione di 1.000.000 cellule per ml e un rapporto di diluizione di 1.000, allora qual è la concentrazione finale del campione diluito?
  • Usando l`equazione:
  • Cvalore terminale= Cvalore iniziale/D
  • Cvalore terminale=1.000.000/1.000
  • Cvalore terminale=1.000 cellule per ml.
  • Immagine titolata Do Serial Dilutions Step 9
    3. Controlla se tutte le unità corrispondono. Quando si esegue un calcolo, è necessario assicurarsi che le unità del risultato finale siano sempre corrette. Se hai iniziato con "cellule per ml", assicurati di terminare anche con "cellule per ml". Se la tua concentrazione iniziale è in "parti per milione (ppm)", anche la tua concentrazione finale dovrebbe essere "ppm".

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