Calibrare le pipette

Una pipetta è un tipo di attrezzatura da laboratorio utilizzata per misurare e trasferire quantità molto piccole di liquido. Precisione e precisione nella misurazione delle pipette sono necessarie poiché qualsiasi deviazione nei volumi dispensati può influenzare i risultati di un esperimento. Per garantire la precisione, è necessario controllare la calibrazione della pipetta ogni pochi mesi. Il processo di calibrazione aiuta a verificare che l`apparecchiatura stia erogando i volumi corretti in modo che possa essere rettificato se non.

Passi

Parte 1 di 2: Controllo della calibrazione

Immagine titolata Do Pipette Calibration Step 1
1. Raccogli i materiali necessari. Per controllare la calibrazione di una pipetta, avrai bisogno di una pipetta, puntali per pipette, acqua distillata, un becher, un termometro, una bilancia e piatti. La bilancia deve essere specifica per microgrammi per calibrare micropipette con un massimo di 1 µl.
  • Non sono necessari più di 5 ml di acqua. Riempi la tazza con l`acqua.
  • Assicurarsi che i puntali delle pipette si adattino correttamente.
Immagine titolata Do Pipette Calibration Step 2
2. Misurare la temperatura dell`acqua distillata. Metti il ​​termometro nell`acqua e lascialo riposare per almeno un minuto. Se la linea rossa sul termometro si muove ancora, lasciarla per un altro minuto. Dopo un minuto, registra la temperatura su un quaderno. Togli il termometro e asciugalo quando hai finito.
  • La temperatura dell`acqua è importante per i calcoli che vengono eseguiti per verificare la calibrazione.
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    3. Appoggiare la bilancia sulla bilancia e azzerarla. Idealmente si utilizza un equilibrio con porte e una stanza isolata. Metti la ciotola nella stanza e chiudi le porte. Se non ci sono porte, basta mettere la ciotola sulla bilancia. Premere il pulsante `Zero` o `Tara` e attendere che il saldo indichi zero.
  • Azzerando la bilancia non viene compreso il peso della ciotola in plastica e diventa possibile misurare solo il peso di ciò che metti nella ciotola.
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    4. Preparare la pipetta per la calibrazione. Pulisci la pipetta con etanolo per eliminare eventuali contaminanti prima di iniziare - assicurati anche che la punta della pipetta non si intasi. Posiziona la punta corretta all`estremità e imposta il volume che desideri testare.
  • Per la calibrazione, testare sia il volume più piccolo che il volume più grande che la pipetta può fornire.
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    5. Lavare la punta prima di calibrare. Premere il pulsante fino al primo arresto e inserire il puntale nell`acqua distillata in modo che circa 2 mm di esso siano immersi nel liquido. Rilasciare il pulsante per aspirare del liquido, quindi erogare nuovamente il liquido premendo il pulsante verso il basso. Ripetere tre volte per lavare la punta.
  • Premere il pulsante fino al secondo arresto per erogare il liquido rimasto nel puntale, quindi rimuovere la pipetta dall`acqua.
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    6. Aspirare il volume di calibrazione. Con la punta fuori dal liquido, premere il pulsante fino alla prima battuta. Mettere circa 2 mm dalla punta nell`acqua distillata e rilasciare il pulsante per aspirare il liquido nella punta. Attendere circa un secondo prima di rimuovere la punta dall`acqua.
  • Assicurarsi che la punta sia completamente sommersa durante il processo di aspirazione. Non vuoi bolle nella punta, altrimenti il ​​risultato non sarà giusto.
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    7. Dosare il liquido nella bilancia sulla bilancia. Appoggia la punta contro il fondo della ciotola e spingi la manopola verso il basso fino alla prima battuta. Spostarsi in un altro punto, leggermente lontano dall`acqua, e premere il pulsante fino alla seconda fermata. Tenere premuto il pulsante e sollevare la punta della bilancia.
  • Tieni il puntale sulla pipetta, perché lo utilizzerai di nuovo per eseguire più test di calibrazione. Assicurati che la punta non tocchi nulla.
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    8. Registrare il peso indicando la bilancia. Chiudere la porta quando si utilizza una bilancia in una stanza isolata. Attendi che i valori smettano di cambiare. Scrivi questo valore nel tuo quaderno.
  • È importante attendere che il numero si stabilizzi prima di scriverlo. Le tue letture saranno sbagliate se non aspetti.
  • Immagine titolata Do Pipette Calibration Step 9
    9. Ripetere questa procedura fino a quando non sono state effettuate almeno 10 misurazioni. Azzerare la bilancia, lavare la punta, aspirare lo stesso volume, erogare il volume, quindi prendere il peso. Hai bisogno di più registrazioni dello stesso volume e quindi puoi fare la media di tutte le registrazioni insieme.
  • È possibile ripetere lo stesso processo con volumi diversi, purché si eseguano più misurazioni per volume.
  • Parte 2 di 2: Calcolo dei risultati

    Immagine titolata Do Pipette Calibration Step 10
    1. Utilizzare la formula per il volume calcolato. La formula per calcolare il volume erogato dalla pipetta è V = w *Z, dove w è il peso dell`acqua, Z è il fattore di conversione basato sulla densità dell`acqua e V è il volume calcolato di quanta acqua ha stato dispensato.
    • Puoi trovare la variabile Z cercando la densità dell`acqua usando la temperatura registrata all`inizio dell`esperimento.
    • Ad esempio: se la temperatura dell`acqua era di 23°C, si assume un valore Z di 1,0035 µg/mg.
    Immagine titolata Do Pipette Calibration Step 11
    2. Calcola la media delle prove ripetute. È necessario aver pesato il volume di acqua erogato dalla pipetta almeno 10 volte. Per calcolare la media di tutti questi valori, sommali e dividi per 10. Se hai eseguito più o meno prove, aggiungi ciascuna prova e dividi la somma per il numero totale di prove.
  • Ad esempio: i dieci pesi registrati per un volume di pipetta di 10 µl sono i seguenti: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 e 9,98.
  • La media è: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99, 84/10 = 9.984
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    3. Applicare le variabili all`equazione e risolverla. Una volta determinati i valori corretti per ciascuna variabile, puoi calcolarli nell`equazione e risolvere il volume calcolato. Per risolvere questo problema, moltiplica semplicemente il peso medio di tutti i valori di test per il valore Z.
  • Ad esempio: V = w *Z = 9,984 *1,0035 = 10,019
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    4. Calcolare la precisione della pipetta. Per calcolare la precisione puoi usare l`equazione A = 100 x Vmedia/V0 utilizzare, dove A è la precisione della pipetta, Vmedia il volume medio calcolato e V0 il valore che hai impostato per il contagocce. La precisione dovrebbe essere compresa tra 99-101%.
  • Se la pipetta è calibrata correttamente, il valore calcolato dovrebbe essere molto vicino al valore effettivo impostato sulla pipetta.
  • Ad esempio: A = 100 x Vmedia/V0 = 100 x 10,019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
  • Questa pipetta è adeguatamente calibrata.
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    5. Inviare la pipetta per la calibrazione, se necessario. Se la pipetta non supera il test di calibrazione, interrompere immediatamente l`utilizzo per gli esperimenti. Le pipette sono parti molto delicate e costose delle apparecchiature di laboratorio. Non puoi riparare la calibrazione da solo, quindi dovrai inviarla per una corretta manutenzione. In alternativa, alcune aziende verranno nel tuo laboratorio e calibreranno le tue pipette.
  • Per assistenza, contattare l`azienda che produce la marca specifica di pipette.

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